Étude des voies d'amélioration génétique par la biologie de la reproduction, les potentialités de clonage in vitro et la symbiose fixatrice d'azote chez ACACIA ALBIDA (DEL.) A. CHEV.

Abstract

L'objectif principal de ce travail est axé sur l'exploration des voies d'amélioration génétique chez Acacia albida. Trois pistes de recherche ont été identifiées. 1) En étudiant la biologie de la reproduction, nous nous sommes intéressés à la phénologie et au système de pollinisation; l'ouverture asynchrone et acropète des fleurs, l'agrégation des monades en une polyade unique, le nombre élevé de polyades émis au cours d'un seul événement pollinatoire. le rapport monade sur ovule (1.5) excédentaire en faveur des grains de pollen, la possibilité pour un stigmate de recevoir simultanément 2 à 3 polyades, démontrent l'effort fourni par la plante pour assurer une pollinisation et une fécondation optimales. Grâce aux marqueurs enzymatiques (estérase), nous avons déterminé l'optimum de réceptivité stigmatique et la durée de viabilité des grains de pollen chez Acacia albida. Par des essais de pollinisation contrôlée, nous avons réussi à estimer quantitativement le niveau d'auto-incompatibilité : l'index d'auto-incompatibilité (lSl) de 0.25, indique qu'Acacia albida est une espèce auto-incompatible bien qu'il existe au niveau individuel une auto-compatibilité partielle. 2) La multiplication végétative a été effectuée sur les arbres adultes et a montré que le potentiel morphogène est tributaire de la saison, de la nature du matériel végétal, de 1’état de maturité du végétal et de paramètres physiologiques non encore identifiés. Cependant l'activité organogène des drageons issus de sujets adultes peut être améliorée par des repiquages fréquents à la suite de l'addition de Phloroglucinol (1g/l) dans le milieu de culture ou après un trempage dans une solution de BAP (20mg/1) pendant 15 heures. L'optimum d'enracinement obtenu à la suite du traitement au Phloroglucinol est de 50%. La culture d'explants racinaires est une méthode très efficace qui a permis chez Acacia albida de régénérer directement à partir du cortex racinaire des bourgeons adventifs. Nous avons montré que le milieu B5 additionné de Spermine 10.5 M stimule de façon optimale la néoformation des bourgeons. 3) L'étude de la symbiose fixatrice d'azote atmosphérique a montré que la richesse du substrat en éléments nutritifs constitue un facteur décisif dans la réponse à l'inoculation. Acacia albido est une espèce qui préfère assimiler les éléments nutritifs du sol plutôt que de recourir à la symbiose. Des études menées in vitro sur la nutrition minérale azotée ont montré cependant que la biomasse et la croissance sont améliorées en présence d'une source d'azote ammoniaquée (5mM). Par ailleurs, Acacia albida est une espèce nodulée aussi bien par les souches de Bradyrhi=ohium que par les souches de Rhizobium: cependant l'association avec les souches de Bradyrhizoboium est plus efficiente. Les cotylédons, grâce à leur forte teneur en azote, jouent un rôle d'azote starter en stimulant la croissance et la nodulation. L'infection rhizobienne s'effectue via les poils absorbants.