Mise au point d'une méthode d'analyse de la vitamine B2 ou riboflavine par chromatographie liquide haute performance; application au dosage dans les farines à base de céréales.

Abstract

La vitamine B2 ou Riboflavine est un nutriment essentiel à divers métabolisme de l'organisme. Elle constitue un coenzyme de multiples réactions métaboliques au niveau de divers tissus et organes et. possède donc un rôle essentiel sur la croissance. La carence en vitamine B2 provoque classiquement une augmentation insuffisante du poids et un retard de croissance chez le nourrisson et l'enfant et des lésions de la peau et des muqueuses (surtout la muqueuse buccale). Les principales sources alimentaires de la vitamine B2 sont diverses notamment les céréales, les légumes et les produits animaux (viandes, poissons, lait, oeufs ). Divers essais et analyses ont permis de mettre au point une méthode d'analyse de la vitamine B2 en deux étapes : *L'extraction de la vitamine B2 par une hydrolyse acide chlorhydrique et. enzymatique ( α-amylase type Takadiastase), suivie d'une purification par déprotéinisation ; *Et le dosage par Chromatographie Liquide Haute Performance en phase inverse avec une phase stationnaire C18 (Zorbax ), parcourue par un mélange (méthanol 30% - acide acétique 0.75% - (NH4)2C03 1% 69.25%) au débit de 1 rnl/mn et une détection dans l'ultraviolet à 266mn, permettant d'obtenir une bonne rétention (facteur de capacité K' égale à 4.01) et séparation au temps de rétention 8.5 minutes. Les Critères de validation appliqués (spécificité, linéarité, répétabilité, exactitude et. limite de détection) ont donné les résultats suivants : *Coefficient de corrélation = 0.9998 et Coefficient de détermination 0.9996 *Coefficient de variation de l'analyse = 5.3 % *Exactitude = 91 % *Limite de détection = 0.02 ug/ml (O.04mg/l00g d'aliment). Ces résultats montrent que la méthode d'analyse est performante. L'application au dosage de la vitamine B2 dans deux catégories de farines à base de céréales destinées à l'alimentation des nourrissons montre que: *Les farines industrielles ont leurs teneurs en vitamine BI déterminées (1.358, 9.542, et 400mg/l00g ) supérieures aux teneurs indiquées par le fabriquant sur le conditionnement respectivement 0.800, 0.600, 0.300mg/100g. Ce qui est courant dans les produits diététiques industriels . *La farine "5 céréales" préparée et proposée par le service de diététique préventive de l'Institut de Santé ) Publique d'abidjan dans le cadre de la réhabilitation nutritionnelle des nourrissons est dosée à 0.201mg de vitamine B2 pour 100g de farine.