Phytochemical studies of Diospyros gilletii De Wild and Diospyros fragrans Gürke (Ebenaceae), chemical transformations and antibacterial, antioxidant and cytotoxic activities of extracts and isolated compounds.

Abstract

La présente thèse porte sur l’isolement et la caractérisation des métabolites secondaires de Diospyros gilletii De Wild et Diospyros fragrans Gürke, deux plantes médicinales Camerounaises appartenant à la famille des Ebenaceae, sur quelques transformations chimiques sur les composés isolés ainsi que l’évaluation des activités biologiques antioxydante, antibactérienne et cytotoxique des extraits, isolats et produits de réaction. De ces deux plantes ont été isolés, au moyen de méthodes chromatographiques en phase liquide, trente-quatre (34) composés parmi lesquels vingt-huit (28) ont été entièrement caractérisés comme appartenant à diverses classes de métabolites secondaires. Il s’agit de cinq (05) isocoumarines parmi lesquelles deux (02) nouvelles auxquelles ont été attribuées les noms triviaux 4-O-p-hydroxybenzoylnorbergenine et 11-O-(E)-cinnamoylnorbergenine et trois connues (03) identifiées à la norbergenine, la 4-O-galloylnorbergenine et la 11-O-phydroxybenzoylnorbergenine ; un (01) dérivé nouveau de naphtalène, le 3,6-dihydroxy-8-methyl-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one et auquel nous avons donné le nom trivial fragranone, douze (12) triterpenes pentacycliques connus identifiés à l’acide ursolique, l’acide oléanolique, l’acide bétulinique, l’acide corosolique, l’acide rotundique, l’acide vismiaefolique, l’acide myrtifolique, l’uvaol, le lupéol, la bétuline, l’hédéragenine et la β- amyrin acetate ; un (01) polyterpène connu, le α-tocopherol ; un (01) monoglyceride connu, le 1-O-(28-hydroxyoctacosanoyl) glycerol ; un (01) caroténoïde connu, la luteine; quatre (04) stérols connus, le mélange de stigmastérol + β-sitostérol et le mélange du 3-O-β-Dglucopyranoside de stigmastérol + β-sitostérol, et trois (03) polyols connus, le quercitol, le 5-O-methyl-myo-inositol et le methyl-β-D-glucopyranoside. L’élucidation structurale de tous ces composés s’est faite sur la base d’une interprétation de leurs données spectrales, en particulier, la RMN 1H et 13C à une et deux dimensions en conjonction avec la spectrométrie de masse, l’IR et l’UV, et quelques fois par analyse aux rayons X. La 4-O-p-hydroxybenzoylnorbergenine, l’acide ursolique, l’acide betulinique et l’acide vismiaefolique ont fait l’objet de deux transformations chimiques : les réactions d’acétylation et d’allylation, ayant conduit à leurs dérivés acetylés et allylés correspondants. Ces dérivés ont été à leur tour entièrement caractérisés à partir de leurs données spectrales et parmi eux, ceux provenant de la 4-O-p-hydroxybenzoylnorbergenine ont été identifiés comme étant nouveaux. Sur le plan biologique les extraits provenant des différentes parties de ces deux plantes ainsi que les composés isolés et hemisynthétiques ont été évalués pour leurs activités antibactérienne contre cinq souches de microorganismes par les méthodes de diffusion de disques et de microdilution, cytotoxique contre les lignées cellulaires KB-3-1 du carcinome du col de l'utérus et les lignées cellulaires HT-29 du cancer du côlon par la méthode de réduction de la resazurine, et enfin antioxydante en utilisant la méthode au DPPH. S’agissant de l’activité antibactérienne, l’acide myrtifolique et le dérivé acetylé de l’acide betulinique ont présenté une bonne activité contre Bacillus subtilis avec des CMI de 31,3 et 250 µg/ mL respectivement. En ce qui concerne l’activité cytotoxique, l’acide corosolique s’est avéré actif sur les deux lignées de cellules cancéreuses KB-3-1 et HT-29 avec des CI50 de 14,6 et 16,5 µM respectivement. Pour ce qui est de l’activité antioxydante, les cinq isocoumarines testées ont présenté de bonnes activités avec des valeurs de CI50comprises entre 8,2-144 µg/ mL.